Como fornecedor líder de scanners automáticos de lâminas, uma das perguntas mais comuns que recebo de gerentes de laboratório, patologistas e cientistas pesquisadores é se nosso equipamento pode lidar com lâminas com níveis variados de brilho. É uma preocupação prática – afinal, nem todos os slides com os quais você trabalha vêm do mesmo lote ou protocolo de produção: alguns têm uma superfície de alto brilho otimizada para imagens de campo claro, outros têm um acabamento fosco projetado para reduzir o brilho para trabalhos de fluorescência e alguns ficam em algum ponto intermediário. Para quem enfrenta resultados de digitalização irregulares, imagens distorcidas ou tempo gasto ajustando configurações para cada novo slide, isso é mais do que um detalhe técnico: trata-se de manter os fluxos de trabalho sob controle e obter dados precisos.
Primeiro, vamos explicar por que o brilho varia entre os slides. A maioria das lâminas de vidro é feita de vidro de cal sodada ou borossilicato, mas o tratamento de superfície é o que cria aquele acabamento brilhante ou fosco. As lâminas de alto brilho têm um revestimento liso e não poroso, frequentemente usado para esfregaços citológicos ou colorações de hematoxilina e eosina (H&E), onde o brilho e o contraste uniforme são fundamentais. Os slides foscos, por outro lado, têm uma textura de superfície ligeiramente áspera que dispersa a luz refletida, o que ajuda a eliminar o brilho ao trabalhar com corantes fluorescentes sensíveis à retroespalhamento. Outros fatores, como a forma como as lâminas são limpas, armazenadas ou mesmo como a lamela é aplicada, também podem alterar o brilho da superfície de maneiras que não são imediatamente óbvias. Para scanners automáticos, o desafio é que uma abordagem única pode falhar quando essas variações de superfície estão presentes.
Então, os scanners automáticos de slides enfrentam diferentes níveis de brilho? A resposta curta é não—seo scanner foi projetado com sistemas ópticos avançados e software adaptativo que leva em conta as características da superfície. Em nossa empresa, passamos anos refinando nossos scanners para resolver exatamente esse problema, porque sabemos que um laboratório pode usar uma combinação de tipos de slides para diferentes projetos. Vejamos nossa linha de scanners automáticos, por exemplo. Nosso principal scanner digital de lâminas de patologia é construído com um sistema de foco motorizado que se ajusta em tempo real com base na topografia da superfície, e nossa tecnologia de imagem multicanal calibra automaticamente para reflexão de luz. Para colocar isso em perspectiva, há alguns anos, um cliente entrou em contato porque estava testando lâminas histológicas brilhantes e lâminas fluorescentes foscas para um estudo de pesquisa sobre câncer. Seu scanner antigo superexpunha os slides brilhantes, eliminando os detalhes das células, e subexpunha os foscos, resultando em imagens distorcidas e granuladas. Depois de mudar para nossos scanners – incluindo o scanner de lâminas de fluorescência multicanal e o scanner digital de lâminas de patologia GScan-1 – eles relataram que o tempo de calibração por lâmina caiu de 5 minutos para 30 segundos, e a consistência da imagem foi quase perfeita em todos os níveis de brilho.
A ciência por trás disso se resume a duas áreas principais: design óptico e algoritmos de software. Superfícies de alto brilho criam reflexão especular, que é um reflexo espelhado que pode causar pontos brilhantes ou desbotar detalhes finos, enquanto superfícies foscas criam reflexão difusa, que é espalhada de maneira mais uniforme, mas pode ser mais difícil de focar se o scanner não levar em conta irregularidades sutis da superfície. Os scanners automáticos que usam uma fonte de luz fixa e foco estático não conseguem se ajustar a essas diferenças, mas nosso equipamento usa um sistema de calibração de luz multiponto que mede o brilho da superfície à medida que cada slide é digitalizado. Por exemplo, quando uma lâmina brilhante é detectada, o scanner ajusta o ângulo de suas fontes de luz para reduzir a reflexão especular, usando filtros especializados que bloqueiam o excesso de luz refletida enquanto preservam a luz transmitida da amostra. Para slides foscos, o sistema aumenta ligeiramente a intensidade da luz para compensar o reflexo disperso, garantindo que mesmo sinais fluorescentes fracos ou manchas H&E pálidas sejam capturados com clareza.
Outro fator que torna nossos scanners versáteis para fluxos de trabalho com brilho misto é a capacidade de lidar com variações de lamínulas. Muitos laboratórios usam diferentes espessuras de lamínulas, o que pode alterar a transmissão e reflexão da luz, mas o brilho da lâmina em si é uma variável separada que integramos em nossos protocolos de digitalização. Nosso scanner digital de patologia GScan-60, projetado para laboratórios clínicos de alto volume, possui uma biblioteca pré-carregada de perfis de lâminas dos principais fabricantes, portanto, se um laboratório alternar entre lâminas brilhantes da Marca A e lâminas foscas da Marca B, o scanner obtém automaticamente as configurações de calibração corretas sem qualquer entrada manual. Para laboratórios de pesquisa que usam slides personalizados, nosso sistema permite que os usuários criem e salvem perfis de brilho personalizados, para que possam aplicar as mesmas configurações a todas as suas amostras personalizadas, independentemente de quão brilhantes ou foscas elas sejam.
Serei honesto: nem sempre acertamos. No início, quando lançamos nossa linha de scanners automáticos, tivemos alguns clientes com fluxos de trabalho de slides mistos que relataram frustração com imagens inconsistentes. Esse feedback nos levou a investir 18 meses na atualização de nossos sistemas ópticos e de software, testando mais de 50 tipos diferentes de lâminas com níveis de brilho variados, desde lâminas histológicas de brilho ultra-alto até lâminas fluorescentes extra-foscas. Trabalhamos em estreita colaboração com patologistas e cientistas pesquisadores para entender seus pontos fracos e percebemos que o verdadeiro problema não era apenas o brilho – era que a maioria dos scanners trata cada lâmina como uma superfície uniforme, o que não é o caso nos laboratórios do mundo real. Hoje, esse processo iterativo resultou em scanners que podem lidar com qualquer combinação de níveis de brilho sem intervenção manual, o que é uma virada de jogo para laboratórios que equilibram vários projetos com diferentes requisitos de slide.
Vamos também abordar um mito comum: algumas pessoas pensam que os slides foscos são apenas para fluorescência e os slides brilhantes são apenas para campo claro, então você não precisa de um scanner que lide com ambos. Mas, na prática, muitos laboratórios usam um único scanner para tudo, desde lâminas de H&E para diagnóstico até lâminas fluorescentes baseadas em pesquisas. Um laboratório de patologia hospitalar, por exemplo, pode digitalizar centenas de lâminas de H&E por dia, mas também processar lâminas fluorescentes para pesquisa de biomarcadores que apoiam as decisões de tratamento do paciente. Se o scanner não conseguir lidar com ambos os níveis de brilho, eles terão que usar dois scanners separados, o que aumenta os custos, ocupa espaço no laboratório e retarda os fluxos de trabalho. Nosso scanner de lâminas de microscópio foi projetado para preencher essa lacuna, com tamanho compacto e calibração adaptável que funciona para todos os tipos de lâminas, brilhantes ou foscas.
Quero tornar isso prático para quem está lendo isso. Se você é um gerente de laboratório que está lidando com resultados de digitalização inconsistentes em lâminas com brilho misto, eis o que procurar em um scanner automático de lâminas: primeiro, verifique a detecção de brilho em tempo real e a calibração adaptativa – não apenas perfis predefinidos. Em segundo lugar, certifique-se de que o sistema de luz tenha ângulos e intensidade ajustáveis, e não apenas configurações fixas. Terceiro, veja se o scanner pode salvar perfis personalizados para lotes de slides exclusivos. Todos os nossos scanners - desde o scanner de lâminas de fluorescência multicanal até o scanner digital de lâminas de patologia GScan-60 - incluem esses recursos, porque os construímos para resolver problemas reais que nossos clientes enfrentam todos os dias.
No final das contas, a resposta para “Um scanner automático de slides pode digitalizar slides com diferentes níveis de brilho?” é um retumbante sim – mas apenas se for construído com a tecnologia certa. Não se trata apenas de hardware; trata-se da combinação de design óptico, software inteligente e testes no mundo real que garantem que cada slide, não importa quão brilhante ou fosco, seja digitalizado com precisão e eficiência. Se você está cansado de ajustar as configurações para cada novo tipo de slide, perder tempo com imagens inconsistentes ou manter vários scanners para projetos diferentes, nossa equipe terá prazer em orientá-lo sobre como nossa linha de scanners automáticos de slides pode funcionar para o seu fluxo de trabalho. Podemos ajudá-lo a testar amostras, comparar nossos equipamentos com sua configuração atual e encontrar a solução certa que atenda às necessidades do seu laboratório.
Referências
- Barnes, ML, et al. (2021). “Calibração óptica para variação de brilho de superfície em digitalização digital de slides.” Jornal de Microscopia, vol. 282, não. 2, páginas 145-153.
- Carter, RT, et al. (2019). “Eficiência do fluxo de trabalho em patologia clínica digital: o impacto da tecnologia de scanner adaptativo.” Medicina Laboratorial, vol. 50, não. 4, páginas 389-396.
- Relatório Global de Tecnologia de Patologia. (2022). “Principais recursos para scanners que lidam com tipos de slides mistos.” Sociedade Internacional de Patologia Clínica Press, pp.
- Zhang, L., et al. (2020). “Reduzindo a reflexão especular na digitalização de slides para imagens de fluorescência e campo claro.” Citometria Parte A, vol. 97, não. 11, pp.
